摘要:在对脑组织进行免疫染色或原位杂交等实验之前,需要对组织进行切片处理。冰冻切片是基础研究中的常用技术,它是在低温条件下将生物组织快速冰冻至一定硬度后进行恒温冰冻切片的一种实验方法。与石蜡切片相比,冰冻切片无需脱水、透明、浸蜡等复杂的前处理过程,使细胞免于抗原活性损伤,且操作简便快捷。相较于振动切片,冰冻切片具有切片厚度限度宽、适用范围广等优点。本文以小鼠脑组织为实验材料,对冰冻切片的操作步骤进行了较为详细的介绍。
关键词: 小鼠, 脑组织, 冰冻切片
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
一、实验准备 打开冰冻切片机电源开关 (图2 A),启动样品头压缩机 (图2 B)。设置冰冻箱温度为-22 °C ~ -20 °C,样品头温度为-18 °C ~ -21 °C。确认手轮处于“锁住”(LOCK) 状态 (图1 D-E),等待降温。 图2. 冰冻切片机程序设置. A. 冰冻切片机电源开关. B. 开启样品头压缩机. C. 冰冻切片机速冻按钮。二、脑组织处理
三、脑组织切片
注意事项
溶液配方
致谢
感谢张琪和吴锦云演示实验操作。
参考文献
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