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物体表面脱落细胞DNA的提取

程凤 |  2020-12-29  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v666
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视频简介 本视频主要是对物体表面的脱落系细胞进行DNA的提取。
样本:鼠标、石头、阴性对照
实验试剂:裂解液、蛋白酶K、DTT、PreFiler BTA Forensic DNAA Extraction Kits
实验仪器:恒温水浴锅、高速离心机、AutoMateExpress核酸提取仪、移液器、1.5ml离心管
实验操作步骤:
1、实验前的操作台消毒、清理;
2、使用分别使用干湿纱布对物体表面进行擦拭,阴性对照中加入未进行擦拭的纱布;
3、样本预处理结束后再次对操作台进行消毒、清理;
4、每个离心管加入220μL裂解液,7μL蛋白酶K,3μL1M DTT,56℃恒温水浴2h;
5、将过滤柱放入一个新的1.5ml离心管中。将上步离心管中的液体全部转移至过滤柱内;
6、高速离心,2min,收集过滤后的液体,放入自动提取仪中,安装试剂条及其他所需的试剂耗 材,选择BTA提取程序和20μL洗脱液的设置,开始自动化提取;
7、将提取后的液体进行定量并放于-20℃储存。可用于后续的个体识别及相关的实验。