摘要:RNA作为细胞内最为重要的信息分子,承担了贮存,转移遗传信息,并能将储存在DNA中的遗传信息传递至蛋白质。不仅如此,一些RNA分子作为核酶在细胞内催化部分反应,部分RNA还能调控基因表达。5-乙炔尿嘧啶核苷 (5-ethynyl uridine, EU),一种可以穿透细胞膜的尿苷类似物,进入细胞后掺入新合成的RNA,且并不掺入DNA。click chemistry反应可以将含有叠氮基的荧光染料与乙炔基团相连接,将新产生的RNA标记上荧光。通过FACS或荧光显微镜检测荧光信号,即可获得细胞内RNA的合成以及RNA含量变化信息。该EU标记RNA的实验方法能够帮助研究者们探究疾病发生机制,且其在药物毒理研究及安全性评价方面都有着普遍的应用。
关键词: RNA synthesis, EU标记法, click chemistry
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
结果与分析
注意事项
溶液配方
致谢
本项目得到中科院生化与细胞所基金的支持。感谢中科院生化与细胞所化学生物学技术平台在高内涵成像分析实验中给予的帮助。
参考文献
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