摘要:藻类植物的主要特征为细胞内含有大量的色素,因其含有色素种类和数量的不同,不同的藻类呈现不同的颜色,因此色素以其特征显著用于微藻群落的分析。本文通过流式细胞仪检测海洋微藻中含有的特征色素成分差异可实现对大批样品中微藻种类鉴定和数量分析的初步研究。
关键词: 海洋微藻, 色素, 流式细胞仪
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
结果与分析
在绿色微藻-小球藻中存在多种荧光色素,如叶绿素、类胡萝卜素和虾青素等,主要呈现肉眼可见绿色和红色。Chen等研究发现,在兼养的条件下,小球藻中存在两种不同的荧光色素花青素和叶绿素,在FL1 (533 nm) 和FL2 (585 nm) 通道都呈现明显的荧光,且细胞大小也出现明显变化,呈现两种大小和色素含量不同的细胞群M1和M2 (图1A 和1C)。前向散射角FSC显示,M1细胞群的细胞尺寸较M2细胞群的细胞尺寸小,纵坐标显示M1细胞群所含花青素和叶绿素较M2细胞群的含量低。通过流式细胞仪可以对微藻所含色素进行快速的定性分析,此外通过标准荧光微球界定荧光的阴性和阳性区域可实现对微藻荧光的定量分析 (Chen等,2017)。图1. 流式分析兼养型小球藻的荧光色素分布. 小球藻在兼养的条件下培养24 h,离心收集藻液,流式细胞仪检测其含有的色素成分。A.和C.横坐标为FSC,显示细胞的大小,纵坐标FL1为小球藻含有的虾青素自发荧光,FL2为小球藻含有的叶绿素自发荧光;B.和D.横坐标代表不同的荧光,纵坐标代表细胞数目 (Chen等,2017)。
溶液配方
致谢
本工作的顺利开展得益于国家自然科学基金项目 (资助号:81703555,81773063,U1505225和81273548)、国家重点基础研究发展计划 (973计划) 项目 (资助号:2015CB931804)、中国大洋专项课题 (资助号:DY135-2-13)、福建省科技厅平台项目 (资助号:2018N2001)、教育厅平台项目和中国博士后科学基金 (资助号:2017M620268)的经费支持。
参考文献
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