摘要：二倍体草莓组培苗通常通过种子培养获得，基于植物的再生能力和植物细胞的全能性，可选择适龄的组培植株，在无菌环境中去除根部及叶片，将茎作为外植体置于适宜的继代培养基培养、分化即可获得无菌组培苗。继代培养可缩短草莓组培苗的培养周期，提高繁殖效率，是一种行之有效的草莓育种方式。
关键词: 草莓, 组织培养, 继代
材料与试剂
- 2 ml离心管
- 乙醇
- NaClO
- MS (Phytotechnology Laboratories, catalog number: M519)
- Glucose
- Agar
- IBA sigma
- NaOH (1 M)
- Sucrose
- 点种子培养基 (1 L) (见溶液配方)
- 继代培养基 (1 L) (见溶液配方)
仪器设备
- 剪刀
- 移液器
实验步骤
- 将草莓种子置于2 ml离心管内，用70%的乙醇清洗30 sec，吸出液体时注意不要吸掉种子。
- 10% NaClO 清洗8 min。
- 无菌水洗5次。
- 将种子均匀点在培养基上，避光7天左右移至光下培养，培养条件为相对湿度60%，光周期为16 h/8 h (日/夜)，光密度为450 µmol m-2 s-1。
- 草莓的继代培养
将生长周期60天左右的无菌草莓组培苗的根及叶片叶柄剪去，将茎段插入继代培养基，每瓶约5个外植体。培养条件为相对湿度60%，光周期为16 h/8 h (日/夜)，光密度为450 µmol m-2 s-1。
溶液配方
- 点种子培养基 (1 L)
MS
| 2.2 g |
Glucose
| 10 g
|
| Agar | 7 g
|
IBA
| 0.01 mg/L |
用1 M NaOH调pH至5.8 - 继代培养基 (1 L)
| MS | 4.4 g |
Sucrose
| 30 g |
Agar
| 7 g |
用1 M NaOH调pH至5.8
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Q&A
Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：魏灵芝 , 毛文文 , 李冰冰, 贾文锁. (2018). 二倍体草莓组培苗的培养和继代.
Bio-101: e1010225. DOI:
10.21769/BioProtoc.1010225.
How to cite: Wei, L. Z., Mao, W. W., Li, B. B. and Jia, W. S. (2018). Production of Diploid Strawberry Seedlings by Tissue Culture and Subculture.
Bio-101: e1010225. DOI:
10.21769/BioProtoc.1010225.
