材料和试剂

线粒体纯化
1. D-甘露醇（Sigma-Aldrich，目录号：M4125）
2.焦磷酸钠（Na 4 P 2 O 7 ·10H 2 O ）（Sigma- Aldrich，目录号：71515-250G）
3. BSA ：牛血清白蛋白（EUROMEDEX，目录号：04-100-812-C）
4.聚乙烯吡咯烷酮-25 （Sigma-Aldrich，目录号：81400 ）
5. β-中号ercaptoethanol （Sigma-Aldrich公司，目录号：M6250）
6. EDTA （Sigma-Aldrich，目录号：EDS）
7. L-半胱氨酸（Sigma-Aldrich，目录号：W326305）
8.磷酸盐缓冲液 1 M ，pH 7 。5
9. Miracoth（Milipore，目录号：475855）
10. P ercoll ® （Sigma-Aldrich公司，目录号：P1644 ）
11. Pierce TM Coomassie（Bradford）蛋白质测定试剂盒（Sigma-Aldrich，目录号：23200）
12. 3 × È xtraction缓冲液（见配方）
13.洗涤缓冲液（见配方）
14. 28% Percoll ®梯度（见配方）

核糖体纯化
1.5 -毫升Eppendorf管
HEPES-KOH （EUROMEDEX，目录号：10-110-C）
KCl （Sigma-Aldrich，目录号：P9541）
MgCl 2 （Sigma-Aldrich，目录号：M8266）
DTT：DL-二硫苏糖醇（Sigma-Aldrich，目录号：D0632）
Triton X-100 （Sigma-Aldrich，目录号：X100）
n-DDM：n-十二烷基β-D-麦芽糖苷（Sigma-Aldrich，目录号：D4641）
蔗糖（Sigma-Aldrich，目录号：S7903）
Ç Ò mplete无EDTA蛋白酶抑制剂混合物（Sigma-Aldrich公司，目录号：11873580001 ）
液态乙烷
液氮 (N 2 )
裂解缓冲液（见配方）
40％š ucrose垫（见配方）
重悬缓冲液（见配方）
10-30％š ucrose梯度（见配方）
最终重悬缓冲液（见配方）
10% n-DDM（见食谱）
50% Triton X-100（见配方）

设备

细胞线粒体ondria净化
金布尔®杜恩斯组织研磨机S，15 - ml和2 -毫升（Sigma-Aldrich公司，目录号：D8938）
榨汁机，Moulinex 140.2.03 型或同等产品
C离心机（Beckman Coulter，型号：AVANTI-JE或同等产品），可采用JA-10和 JA - 25.5 转子
JA - 25.5固定角转子 8 × 50 - ml Beckman Coulter 或同等产品
JA - 25.5管：圆形Ç entrifuge吨UBE p olycarbonate，50 -毫升（的Nalgene，目录号：3117-0500）
JA-10 固定角转子 6 × 500 - ml Beckman Coulter 或同等产品
F500瓶：离心机b ottle与小号Ealing的Ç AP，PPCO，500 -毫升（的Nalgene，目录号：3141-0500）
台式顶部离心机（例如，微量离心，型号：5427R ）
甲圆-型画笔（例如，温莎＆牛顿水彩黑貂N°10）

核糖体纯化
BioComp 梯度母版 108
BioComp 活塞梯度分馏器
超速离心机（Beckman Coulter，型号：OPTIMA XE90，或同等产品），能够使用60Ti和 SW41 转子
˚F ixed角转子8 × 38.5 -毫升（贝克曼Coulter公司，型号：60的Ti或等效）
60个钛管：26.3 -毫升聚碳酸酯b ottle与Ç AP一个ssembly（Beckman Coulter公司，目录号：355618）
S翼转子 6 × 13 - ml （贝克曼库尔特，型号：SW41 Ti或同等产品）
SW41钛管：1 3.2 -毫升，开路吨运算吨hinwall ù ltra- Ç利尔吨UBE（Beckman Coulter公司，目录号：344059）
超速离心机（Beckman Coulter，型号：OPTIMA MAX XP或同等产品），能够使用TLA 110转子
˚F ixed角转子8 × 5.1 -毫升（Beckman Coulter公司，型号：TLA110或等效）
旋转轮1.5 -毫升管

Mitoribosome 冷冻网格制备和数据收集
Quantifoils R2 / 2 EM网格（Ë lectron中号icroscopy小号ciences ，目录号：Q210CR2）
Cryo -网格箱存储
Safematic CCU-010 ç阿尔邦涂布机或等效（LABTECH-EM，目录号：100001）
辉光d ischarge小号ystem从ELMO或等效
Thermo Fisher Vitrobot Mark IV 或同等产品
Thermo Fisher Talos Artica 200kV 或 Titan Krios 300kV 冷冻电镜显微镜或同等产品
猎鹰III直接检测器装置或等效/优越（例如，加坦峰会K2，K3，隼IV）

软件

RELION（MRC 实验室，https: //www3.mrc-lmb.cam.ac.uk/relion/index.php/Main_Page ）
CryoSPARC（Structura Biotechnology Inc，https: //cryosparc.com/ ）
MotionCor2 (Shawn Zheng) ( https://emcore.ucsf.edu/ucsf-software )
Gctf ( Zhang , 2016 ; https://www2.mrc-lmb.cam.ac.uk/research/locally-develop-software/zhang-software/ )
Resmap ( http://resmap.sourceforge.net/ )
嵌合体（加州大学旧金山分校，https ://www.cgl.ucsf.edu/chimera/ ）

程序

花椰菜线粒体的提取纯化
缓冲液在线粒体纯化前一天制备，并储存在 4°C。珀®-包含的解决方案必须进行检查，EN确保没有污染，已经发生了。对于含有溶液BSA，L- Ç ÿ Steine区，和β巯基乙醇，这些部件必须对线粒体PURIF的日子，可以加入ication。花椰菜是从市场上新鲜购买的，两天内用完。线粒体纯化总共需要半天时间。整个过程总结在图 1A 中。

图1.总体工作流程对线粒体和mitoribosome纯化。介绍了线粒体 ( A ) 和线粒体( B ) 纯化的整体工作流程。

取一个 1 - 1.5 公斤的花椰菜。用刀丢弃叶子和发霉的斑点（如果有的话），只保留花序。
切花椰菜花序中以毛坯件的约4 × 4cm左右。硬CENTE ř片花椰菜的花序可以被丢弃。剩余的总重量应为 0.8 - 1 公斤。
准备一个装有 300 ml 3 ×提取缓冲液的 1 - L 烧杯，并在缓慢旋转的情况下放置在磁力搅拌器上。
P花边花椰菜的件，一个接一个，在榨汁机，并直接在含有烧杯检索汁3 ×抽提缓冲液。完全提取后的最终总体积应约为 900 毫升。如果总体积低于 900 毫升，则添加蒸馏水直至达到所需体积。
确保该菜花汁以及均质与提取缓冲液的其余部分。
滤波器吨他溶液通过放置在一个大漏斗在另一个1 MIRACLOTH两层-升烧杯中用于检索过滤的溶液。
除法吨在他溶液至2个F500瓶和离心机在1250 ×克在4℃下10分钟。
保留上清液并重复上一步。在这两个步骤中，细胞碎片被去除。
离心机吨他保持在17000上清液×克20分钟，在4℃。在这一步中，细胞器被颗粒化。
丢弃的通过反转瓶上清液; 在小球会粘在容器的底部。
每个瓶子应包含一个 4 × 2 cm 的粘稠黄色/橙色颗粒。
向含有细胞器颗粒的瓶子中加入 5 ml洗涤缓冲液。不要将洗涤缓冲液直接倒在颗粒上，以避免重新悬浮大块。
轻轻悬浮牛逼他小球用圆形-型画笔。为了这样做，轻轻地刷粒料与尖端画笔瓦特往往微不足道在洗涤缓冲液浸没，从颗粒到CENTE的外部部分- [R ，以避免重悬大块。一旦完全悬浮，洗的画笔与洗涤缓冲液来获取剩余的细胞器。
Ť转让（BOT）吨他再悬浮沉淀于15 -毫升玻璃杜恩斯波特。用 5 毫升洗涤缓冲液冲洗瓶子并转移到D盎司陶工。该步骤是针对每个颗粒单独执行的。
使用D盎司陶器和研杵 A（提供最小阻力以避免破坏细胞器），使用5 次敲击使重新悬浮的颗粒溶液均质化。
池第r esuspended和homogeni Ž ED细胞器粒料的解决方案和使总体积为100毫升，洗涤缓冲液。
独立的T他细胞器溶液成四个JA -在13000 25.5管和离心机×克在4℃下15分钟（d uring离心，制备用于步骤A 22 ）。
ç arefully丢弃牛逼他物上清液吹打出来。
ģ ently重悬Ë ACH粒料使用圆形-在1.5型漆刷- 2 ml的洗涤缓冲液如在小号TEP甲13 。
Ť转让（BOT）ë ACH沉淀溶液的2 -毫升玻璃d通过使用1盎司吹打波特-毫升吸管与1 -在端毫升尖切至给一个较大的开口。^ h omogeni ž Ë在p ellet解决方案与10招用杵A.
冲洗一个LL JA - 25.5管共1毫升洗涤缓冲液，和凝聚的homogeni Ž使用ed粒料一起洗涤缓冲液用于冲洗管。总体积应约为 18 毫升。
层2 - 3毫升homogeni Ž ED细胞器溶液轻轻到30毫升28％的Percoll ®梯度在JA - 25.5管。总共6 -根据获得的重悬的细胞器粒料的最终体积8管是必要在步骤A 21 。
Ç entrifuge吨他梯度以40,000 ×克为1小时30分钟，在4℃，而不在制动以避免干扰梯度。
在此阶段之后，线粒体应在距管底部约 1/3 处以雾状黄色/白色带的形式出现在梯度中（图 1A）。
通过移液直到0.5 cm梯度溶液保持在带上方，丢弃线粒体带顶部的梯度溶液。
使用1检索线粒体带-毫升吸管与1 -在端毫升尖切至给一个较大的开口。也可以使用5 - ml 移液器。
将所有线粒体汇集在一起并用洗涤缓冲液稀释至少 6倍。
分裂稀释线粒体中以4 - 6 JA - 25.5管和离心15分钟，在18000 ×克于4℃。
小心地弃去上清液，将线粒体重悬在与前面所述相同的体积中，然后重复离心步骤。该步骤的目的是为了除去大部分的上述珀®从线粒体悬浮液。
小心丢弃上清液，并在1 ml洗涤缓冲液中重悬每个线粒体颗粒。此构成小号纯化的线粒体。
在F线粒体伊纳勒量可以通过执行布拉德福德进行评价测定。通常，在所获得的最终线粒体溶液小号TEP甲30必须稀释至少10 ×执行Bradford测定法; 否则，测量饱和度，可能会发生，从而导致一个纯化的线粒体的实际量的underappreciation。预计 1 公斤花椰菜可产出 50 毫克线粒体。
甲liquot和粒料（16,000 ×克，5分钟，4℃）的线粒体中，以2 -毫升Eppendorf管中，弃去上清液，快速冷冻在液氮中线粒体粒料，在-80和存储℃。

核糖体纯化
在 mitoribosome 纯化前一天准备库存缓冲液，过滤 (0.2 - µm) 并在 4°C 下储存；在本质上可以保持数月。不含蔗糖的溶液可在纯化前一天制备。DTT和蛋白酶抑制剂小号应添加立即摆在我们面前ê 。对于此过程，至少50毫升升ysis缓冲器，将20ml 40％小号ucrose坐垫，和25毫升10 ％和30％的小号ucrose梯度溶液应来制备。整体mitoribosome纯化过程类似于在古典核糖体的纯化和应适用于任何类型的线粒体，虽然洗涤剂和缓冲液组合物将具有用于各自的线粒体样品进行优化。在所有步骤中，一定要在冰上工作。

从结束程序甲，线粒体是在2干燥颗粒-毫升Eppendorf管中。取40 - 50 毫克冷冻线粒体。填写Eppendorf管与升ysis缓冲和允许冷冻粒料到冰上解冻。每隔几分钟，使用1重悬粒料-毫升吸管与1 -毫升尖。
一旦所有的颗粒都解冻并合理地重新悬浮，将重新悬浮的线粒体溶液汇集到一个 50 - ml Falcon 管中。稀释至终浓度 1 - 1.2 mg/ml ；你最终应该总共有 40 - 50 毫升。
Ť转让（BOT）吨他线粒体悬浮溶液以15 -毫升（几个步骤是必要的）玻璃d盎司波特。裂解的米使用杵B（它提供以打破细胞器最电阻）itochondria。至少需要 10 次冲程。
转移到 JA - 25.5 管中，并在 4°C 下以 25,000 × g离心 20 分钟。保留上清液。
ģ ently层吨他裂解物到40％的蔗糖垫在60Ti管中。每管应包含 3.5 毫升蔗糖溶液和 9 - 11 毫升线粒体裂解液。中号平底船管，其中，所述的外部粒料应离心后。
将蔗糖垫在 4°C 下以 235,000 × g 的速度在带有 60Ti 转子或等效物的n超速离心机中离心3 小时。
小心地将管子从离心机中取出。在这个阶段，可以在试管底部观察到清晰的圆形颗粒。如果没有，取上清液后，他们将是可见公顷š被删除。这些颗粒含有高分子量线粒体复合物：核糖体、分离的亚基，还有呼吸复合物等。
使用自动移液器从每个管中取出上清液。去除T他过去几年millilite [R S ^小心使用1 -毫升吸管与1 -毫升尖。重复使用200 -微升吸管200 -微升尖端的连接确保所有上清已被删除。
通过添加 50 µl 重悬缓冲液并轻轻滚动管子来清洗沉淀物，让液体洗过沉淀物，而不会真正重新悬浮它们。这样做的目的是去除的最大剩余蔗糖。丢弃缓冲区。
通过添加 100 µl 重悬缓冲液重悬颗粒。使用200 -微升或100 -微升移液管和所述一个ppropri吃尖端，通过吸取悬浮粒料的液体向上和向下。颗粒将难以重新悬浮；尽量避免刮伤你的吸管尖的小球，因为次é颗粒会坚持到尖而不重悬。此外，尽量避免发电机密封荷兰国际集团的气泡，因为更多的复合物被暴露于空气中，就越倾向于降低，这会最终阻碍数据的质量。
池再悬浮小球到1.5 -毫升Eppendorf管; 用 50 µl 重悬缓冲液清洁每个 60Ti 管并添加到 Eppendorf 管中。使用200 -微升或100 -微升移液管和相应的尖端，移液管将溶液上下最大化再悬浮。地方吨上在4℃下旋转轮他Eppendorf管在中速为30 - 60分钟，以允许对复合物的进一步重悬。在第是步骤，准备连续蔗糖梯度为步骤B 13。
在这一阶段，可以执行一个粗略的孔定量吨的通货膨胀的使用纳米粗线粒体核蛋白体d ROP TM装置通过测量任一（使用BSA等效测量）的RNA或蛋白质浓度。的吸收曲线应该有两个峰，在260纳米和280纳米，表示该部分确实含有核糖体。在这个阶段，您总共应该有 6 , 000 - 9 , 000 µg 蛋白质。
制备Ç ontinuous 10-30％蔗糖梯度（长在SW41管使用梯度，短帽）BioComp梯度主108 。
轻轻层3 ，000 - 6 ，000微克粗核糖体溶液（在200 - 300微升）到10-30％的蔗糖梯度。通常需要两个梯度。如果您有少于4 ，000微克原油核糖体，不拆的溶液中，以2 ; 否则，这将导致您的复合物过度稀释；尝试将所有内容加载到一个渐变上。
将梯度以 86,600 × g的速度在 4°C（最大加速和减速）下离心15 小时过夜。
第二天，分馏使用BioComp活塞梯度分馏器装置中的梯度; 应收集350 µl 的 30 级分。监视器吨他吸光度260纳米和280纳米至选择核糖体-含有级分。一般，3个主要观察到峰，对应（从从轻到重）到小亚基，大亚基，和monosomes（图2）。我˚F制作多梯度，池对应同一峰的所有部分。

图表描述已自动生成
图 2. 粗 mitoribosome 分离后的代表性蔗糖梯度分布。显示了由10-30% 蔗糖梯度上的mitoribosome 分离产生的代表性曲线；显示 260 nm 处的吸光度。这些级分的组合物，可以通过质谱来评估法analys我S或直接冷冻电镜检查。SSU小号都在重质部分的轻质部分和monosomes发现。污染与仍然可以发生其他线粒体复合物，尽管通常只限于最轻馏分，和胞质核糖体小号（在相同的级分monosomes）也可以取决于线粒体纯度找到。

沉淀第r离心ibosomes在624000 ×克为在2小时，在4℃ Ñ具有转子诸如TLA110超速离心。标记管子以记住它们的方向，因为颗粒很难看到。
丢弃上清液；在试管底部应该可以看到清晰的黄色颗粒。确保去除全部上清液，因为蔗糖会在冷冻电镜分析过程中影响显微照片的质量。然而，蛋白质组学小号或RNA分析，这并不重要。
重悬30微升核糖体丸粒最后重悬浮缓冲液，并转移到1.5 -毫升Eppendorf管中于冰上。颗粒应易于重新悬浮。首先，颗粒应重新悬浮在小体积中，以避免核糖体过度稀释。甲增益，关键的是要避免气泡和最小化的空气/水界面。
定量吨他核糖体作为在使用纳米步骤B12 d ROP TM设备。冷冻电镜的理想浓度是 1 - 2 µg/µl 蛋白质（使用 BSA 等效测量）。这里，该吸收曲线应该是在260nm处具有强峰和峰的280nm处高度的一半。260/280 比率应约为 1.9。
在这个阶段，应该直接准备冷冻电镜网格。也可以等分试样在所需的浓度和闪光灯核糖体-在用于进一步analys液氮冻结他们我S（蛋白质组学，RNA分析，等等。）。您可以从以前闪解冻核糖体准备冷冻电镜格-冻结的氮，但是这会妨碍你配合的质量。

ç亮-grid准备
在这一阶段，塑料-自由的Quantifoil R2 / 2 300目多孔碳网格小号涂覆有薄自制连续的碳薄膜（由汽化的薄碳层（2纳米）使用Safematic CCU-010 Ç阿尔邦涂布机和浮动荷兰国际集团它在顶部的网格）被使用。
G使用辉光放电装置在3 mA 下对网格进行低放电20 秒。
液化的气态乙烷我n中Vitrobot Mark IV的设备低温容器使用液氮。
使用Vitrobot Mark IV 设备准备低温网格。腔室参数小号如下：温度4℃，湿度为100％。
应用4微升核糖体溶液于格栅在一个浓度的1 - 2微克/微升。孵育吨他样品在网格上30秒，在用滤纸吸干自动2秒钟一个印迹力的5 ，和闪光灯- FR EEZE在液体乙烷。每个样品至少应准备一式两份。
将网格转移到液氮中并存储直到数据采集。

数据分析

冷冻电镜数据处理将根据不同的样品和显微镜使用d 。该过程的概述这里提出，并且还提供了图3中的数据集合中的一个可视摘要上的200或300千伏冷冻电镜仪器进行，如塔洛斯ARCTICA或泰坦Krios仪器（热˚F isher） . 取决于所述样品的浓度和固有可变性的的分子复合物，更高或更低数目的显微照片应收集。我们推荐至少 4 , 000 张此处使用的放大倍率的显微照片。数据是在 -0.5 到 -2.7 µm 的标称欠焦处以 0.2 步长收集的。在我们的情况下，我们在收集的120000的放大倍数× ，得到1.21埃的像素大小，使用猎鹰III直接电子检测器（热˚F isher），但是这会改变取决于显微镜和照相机类型。显微照片被记录为电影栈，并且每个电影堆被分馏成20帧为对应于60 E / A2的电子剂量1个s的总曝光。所述克样品的质量ENERAL可使用上即时处理由CryoSPARC实时提供进行评估（Punjani等人，2017）。

图片包含图标描述已自动生成
图 3. Cryo-EM 数据处理工作流程。介绍了冷冻电镜数据处理的整体工作流程。

显微照片电影被转移到一个能够进行冷冻 EM 数据处理的工作站。使用 RELION （Nakane等人，2018 年；Zivanov等人，2018 年），显微照片经过漂移和增益校正，并使用 MotionCor2 进行剂量加权（Zheng等人，2017 年）。Gctf (Zhang, 2016)用于确定对比度传递函数。然后颗粒被使用的拉普拉斯拾取ģ aussian功能（最好直径260埃，最大直径460埃）。粒子首先提交给无参考的 2D 分类，并丢弃所有非核糖体粒子。越多的粒子，效果越好，但分辨率高的也可以用，取决于该络合物较少的颗粒来实现的。因此，在这个步骤结束，我们建议甲肝荷兰国际集团超过10万级的颗粒。所得颗粒被提取和3D -分类（5 - 10班是必要的），使用适当的3D参考（从CryoSPARC或RELION任monosome或亚单位重建获得）。在此步骤中，颗粒可以被装仓2 - 4次以加快3D分类。选择描述高分辨率特征（细节）的类进行进一步处理。这些粒子用于 3D-autorefine ，然后对得到的重建进行后处理以获得最终重建。
然后可以执行进一步处理以提高重建的分辨率。首先，RELION -集成CTF细化和贝叶斯抛光可应用于; 这一步提高了我们重建的分辨率由0.2 - 1埃。然后，由于核糖体的内在可变性，可以进行集中精修和/或多体精修，以提高重建的局部分辨率。要做到这一点，路易斯安那州立大学，头：掩码为核糖体的主要部分创建了SSU ，和SSU的身体。然后在聚焦细化和/或多体细化期间使用遮罩。在植物mitoribosome，无论多体和聚焦被用来细化方法的情况下，与多体细化得到的更好的分辨率高度移动SSU头扩展（中根等人，2018;华尔兹等人，2020A）。由此产生的重建可以在 Chimera 或 ChimeraX 中可视化（Pettersen等人，2004 年；Goddard等人，2018 年）。然后可以使用 ResMap (Kucukelbir et al. , 2014)估计重建的局部分辨率。

食谱

注：所有缓冲小号都保持在低温在4℃。

线粒体纯化
3 × È xtraction缓冲
0.9M的米annitol
90mM的小号裂果焦磷酸（10H 2 O）
6 mM EDTA
2.4％（W / V）p olyvinylpyrrolidone-25
用 37% HCl 将 pH 值调节至 7.5
0.8% (w/v) BSA （最后添加）
0.15％（W / V）Ç ysteine （在末尾添加）
6 mM β-巯基乙醇（最后添加）
洗涤缓冲液
0.3M的米annitol
1 mM EDTA
10mM的p hosphate缓冲，pH为7.5
28% Percoll 梯度
0.3M的米annitol
10mM的p hosphate缓冲，pH为7.5
28% (v/v) Percoll

核糖体纯化
裂解缓冲液
20 mM HEPES-KOH ，pH 7.6
100 毫米氯化钾
30 mM氯化镁2
1 毫米 DTT
1.5% (v/v) 海卫 X-100
0.3% n-DDM
100微克/微升Ç hloramphenicol
完全的
40％š ucrose缓冲
20 mM HEPES-KOH ，pH 7.6
100 毫米氯化钾
30 mM氯化镁2
1 毫米 DTT
0.25% (v/v) 海卫 X-100
0.02% n-DDM
完全的
40% (w/v) 蔗糖
重悬缓冲液
20 mM HEPES-K OH ，pH 7.6
100 毫米氯化钾
30 mM氯化镁2
1 毫米 DTT
0.02% n-DDM
完全的
10-30％小号ucrose梯度
20 mM HEPES-KOH，pH 7.6
100 毫米氯化钾
30 mM氯化镁2
1 毫米 DTT
0.01% n-DDM
完全的
10 %或 30% (w/v) 蔗糖
最终重悬缓冲液
20 mM HEPES-KOH，pH 7.6
100 毫米氯化钾
30 mM氯化镁2
1 毫米 DTT
0.01% n-DDM
完全的
完成 25 ×
将 1 片不含 EDTA 的完全蛋白酶抑制剂溶解在 2 ml 不含 RNase 的水中，
并在 -20°C 下储存
10% n-DDM
将 10% (w/v) n-DDM 溶解在 5 ml 无 RNase 的水中
分装并储存在 -20°C
50% 海卫 X-100
将 Triton X-100 溶解到 50% 浓度 (v/v) 的 10 ml 无 RNase 水中。为了获得最佳的混合，加热至45℃，在一个水浴中。
分装并储存在 -20°C

致谢

这项工作是由“学院支持ñ憩德拉小号安特等德拉- [R echerche中号édicale ，”该“中心法国国家科学研究，”斯特拉斯堡大学，由法新社国立德拉RECHERCHE（ANR）资助（MITRA ，ANR-16-CE11-0024-02，到PG和YH），以及由LabEx财团MitoCross在法国国家方案D'政府投资艾文莉（ANR-11-的LabX-0057_MITOCROSS）的框架，以及由欧洲研究委员会启动补助金（TransTryp ID 759120，给 YH）。

利益争夺

作者声明没有竞争利益。

参考

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De Silva, D.、Tu, YT、Amunts, A.、Fontanesi, F. 和 Barrientos, A. (2015)。健康和疾病中的线粒体核糖体组装。细胞周期14(14)：2226-2250。
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